Студия быстрый вектор: Студия Быстрый Вектор — дизайн, реклама, перевод

Вас также может заинтересовать

Проверка программы раннего тестирования Использование виртуального ATE

Ускорение запуска и отладки шаблона ATE

Ранняя проверка программы тестирования

Ускорение шаблона ATE

Векторное клонирование | Векторбилдер

Являясь крупнейшим в мире поставщиком услуг клонирования пользовательских векторов, VectorBuilder может практически клонировать любой пользовательский вектор ДНК, адаптированный к вашим исследовательским потребностям. Около 200 векторных систем на нашей платформе были оптимизированы благодаря обширным исследованиям и разработкам, и все они прошли проверку in vitro и, где применимо, in vivo. Благодаря непревзойденной цене и быстрой окупаемости клонирование на стороне VectorBuilder часто дешевле, чем клонирование своими руками в лаборатории с точки зрения затрат на реагенты и рабочую силу, не говоря уже об экономии вашего времени, усилий и разочарований, связанных с клонированием. Помимо молекулярного клонирования ДНК-векторов, мы также предлагаем множество сопутствующих услуг, таких как подготовка плазмидной ДНК, упаковка вирусов (лентивирусов, AAV, аденовирусов, MMLV, бакуловирусов и т. д.), создание библиотек, рекомбинация BAC, мутагенез, создание стабильных клеточных линий и подготовка РНК.

Основные моменты

• Бесплатная и интуитивно понятная онлайн-студия векторного дизайна, позволяющая быстро создавать собственные векторы для различных приложений.
• Огромный перечень основ векторов и компонентов векторов, экономящий ваше время и деньги на клонировании (только около 20 % наших проектов нуждаются в синтезе генов de novo).
• Функционально проверенные основы и компоненты векторов, дающие надежные экспериментальные результаты.
• Использование универсальных технологий клонирования для создания векторов с простыми и сложными конструкциями.
• Большой опыт клонирования сложных векторов.
• Простое получение последующих услуг, таких как подготовка плазмидной ДНК и упаковка вируса.
• 100% гарантия последовательности.
• Бесплатное хранение векторов до 6 месяцев.
• IP пользовательских векторов, принадлежащих клиентам.

Нажмите, чтобы просмотреть более 1000 упоминаний 
Нажмите, чтобы просмотреть отзывы пользователей 

Информация об услугах

• Цена и сроки выполнения
• Результаты
• Контроль качества (КК)
• Материалы, предоставляемые заказчиком

Как заказать

Часто задаваемые вопросы

Сервисная информация

Цена и сроки выполнения

Наш рабочий процесс клонирования нестандартного вектора обычно состоит из трех частей: контроль качества материалов, предоставляемых заказчиком (если применимо), поиск необходимых векторных компонентов (если применимо) и фактический этап клонирования вектора. Краткий обзор цены и разбивки оборота показан в Таблице 1 ниже:

Таблица 1. Обзор цен и сроков выполнения пользовательского клонирования.

	Векторное клонирование*	Источник компонентов вектора (если применимо)			Контроль качества материалов, предоставленных заказчиком (если применимо)
Тип	Зависит от сложности векторного дизайна	Шаблон в наличии	Шаблон, предоставляемый заказчиком	Генный синтез de novo	В качестве векторной основы	В качестве источника компонента вектора
Цена	а. Для экспрессии кшРНК, гРНК и коротких фрагментов (например, энхансер, промотор): от 99 долларов США. б. Для экспрессии белка: от 159 долларов США.	От 0 до 50 долларов за >80% шаблонов	$0	См. Таблицу 3	150 долларов	От $120
Оборот**	1-3 недели для >80% проектов	Сразу доступно	Доступен сразу после прохождения контроля качества	См. Таблицу 3	3-5 дней
Описание	Методы клонирования включают ПЦР, клонирование на основе лигирования, клонирование Gibson, Gateway и Golden Gate	, имеющиеся в наличии, включают промоторы, ORF, маркеры, линкеры и белковые метки.		Около 20% проектов нуждаются в генном синтезе de novo	QC включает количественную оценку, повторную трансформацию, подготовку плазмиды, расщепление RE и секвенирование по Сэнгеру.

Примечание:

* Векторы, созданные на основе стандартных магистральных сетей и компонентов VectorBuilder, имеют фиксированную цену и сроки выполнения работ согласно таблице 2 ниже.

** Под циклом клонирования понимается время от начала производства до его завершения. Он не включает время в пути и контроль качества материалов, предоставленных заказчиком, а также время в пути для доставки готовой продукции заказчику.

Таблица 2. Цена и сроки выполнения простого векторного клонирования.

Таблица 3. Цена и оборот для синтеза гена de novo.

Длина фрагмента	Цена (долл. США)*	Оборот
<1,5 КБ	0,12 $/бп	6-10 дней
1,5-3 КБ	0,14 $/бп	10-14 дней
3-5 КБ	0,16 $/бп	10-16 дней
5-7 КБ	0,18 долл. США за баррель	16-20 дней

* Плата за синтез гена de novo может быть выше, если 1) фрагмент содержит трудно синтезируемые участки, такие как высокое содержание GC, простые повторы или сегментарные повторы; 2) синтезируется менее трех фрагментов ДНК.

Результаты

Формат результатов по умолчанию — запас глицерина E. coli. По запросу небольшое количество плазмидной ДНК может быть предоставлено без дополнительной оплаты. Можно дополнительно приобрести несколько весов высококачественной плазмидной ДНК: Miniprep (> 10 мкг), Midiprep (> 100 мкг), Maxiprep (> 300 мкг), Megaprep (> 1 мг) и Gigaprep (> 10 мг). Для вирусных векторов упаковка вирусов, предлагаемая в различных масштабах, доступна в качестве последующей услуги.

Контроль качества (КК)

Все векторы, клонированные с помощью VectorBuilder, имеют 100% гарантию последовательности. Наши векторы проходят строгий контроль качества, чтобы гарантировать, что они содержат правильную последовательность именно так, как задумано. Общий контроль качества включает количественную оценку ДНК, измерение A260/280, электрофорез нерасщепленной и расщепленной рестрикционными ферментами плазмидной ДНК, секвенирование по Сэнгеру, извлечение бактерий из запасов глицерина и повторную трансформацию.

Материалы заказчика

Если необходимы предоставленные заказчиком материалы, такие как скелеты или шаблоны генов, отправьте информацию о своих материалах в разделе «Поддержка» > «Форма подачи материалов». Пожалуйста, строго следуйте нашим инструкциям по организации доставки, чтобы избежать задержек или повреждения материалов. Все материалы, предоставленные заказчиком, проходят обязательный контроль качества компанией VectorBuilder, за который может взиматься дополнительная плата за контроль качества, начиная со 120 долларов США за элемент, в зависимости от типа и использования элемента. Обратите внимание, что производство не может быть начато до тех пор, пока предоставленные заказчиком материалы не пройдут контроль качества.

Как сделать заказ

Часто задаваемые вопросы

Какие методы использует VectorBuilder для своих услуг векторного клонирования?

Компания VectorBuilder использует комбинацию различных методов молекулярной биологии для создания пользовательских векторов на основе потребностей клиентов. В то время как векторы экспрессии обычно создаются с использованием клонирования Gateway или сборки Gibson, векторы кшРНК и гРНК клонируются с использованием подхода, основанного на лигировании, чтобы предоставить вам желаемые векторы по самым низким ценам и в кратчайшие сроки с использованием нашей оптимизированной высокопроизводительной платформы клонирования. Кроме того, мы регулярно используем множество других методов, включая синтез генов de novo и клонирование Golden Gate по мере необходимости, в зависимости от проекта.

Какой бактериальный штамм использует VectorBuilder для клонирования своих векторов? Какие бактериальные штаммы можно использовать для размножения моей плазмиды, полученной из VectorBuilder?

Все векторы в VectorBuilder клонированы с использованием нашего запатентованного штамма-хозяина VB UltraStable ^™ , который предназначен для достижения высокой эффективности трансформации (> 1×10 ⁹ КОЕ/мкг) и для размножения плазмид ДНК с нестабильными элементами, такими как повторяющиеся последовательности. Поэтому мы настоятельно рекомендуем вам использовать VB UltraStable 9.0070 ™ химически компетентные клетки для размножения ваших плазмид, полученные от VectorBuilder. Однако наши векторы совместимы с другими широко используемыми штаммами бактерий-хозяев, такими как DH5α и Stbl3, и могут быть размножены ими.

Почему выход моего препарата плазмиды такой низкий?

Место начала репликации на вашей плазмиде предназначено для репликации с малым числом копий

Количество копий плазмиды на бактериальную клетку определяется местом начала репликации на плазмиде. Некоторым источникам присуще низкое число копий. Проверьте номер копии источника репликации на вашей плазмиде. Для низкокопийных плазмид увеличьте количество культуры E. coli для подготовки плазмидной ДНК, чтобы получить удовлетворительный выход ДНК.

Проверьте номер копии источника репликации плазмид, поставляемых VectorBuilder

Объем бактериальной культуры слишком мал для колонки для приготовления плазмид

Пожалуйста, проверьте связывающую способность вашей колонки для приготовления плазмид и является ли ваша или малокопийная плазмида. Для мини-препаратов мы рекомендуем собирать 1-5 мл ночной бактериальной культуры. Для макси-препаратов, если плазмида является высококопийной плазмидой, мы рекомендуем использовать 100-150 мл ночной бактериальной культуры; если плазмида низкокопийная плазмида, мы рекомендуем использовать 300-500 мл ночной бактериальной культуры. Как правило, для высококопийной плазмиды ~5 мкг плазмидной ДНК можно экстрагировать из каждого 1 мл культуры в минипрепарате и ~500 мкг плазмидной ДНК можно получить из 150 мл культуры; для низкокопийной плазмиды (например, рЕТ) 1,5-2,5 мкг плазмидной ДНК можно собрать из каждого 1 мл культуры в минипрепарате и 150-200 мкг плазмидной ДНК можно получить из 150 мл культуры.

Только часть бактерий в жидкой культуре содержит плазмиды

Некоторые антибиотики, в частности ампициллин, быстро разлагаются в жидкой культуре. В результате бактерии, не содержащие плазмиды, могут распространяться на значительную часть культуры, вызывая плохой выход препарата плазмиды. Чтобы избежать этого, приготовьте свежую питательную среду, содержащую ампициллин, перед использованием и убедитесь, что имеется достаточное количество ампициллина. Кроме того, при культивировании устойчивых к ампициллину бактерий не допускайте слишком длительного насыщения жидкой культуры перед сбором урожая. Помимо недостаточного количества антибиотиков в культуре, выделение плазмидной ДНК из очень старой культуры также может привести к низкому выходу, поскольку многие бактериальные клетки мертвы, а содержащаяся в них плазмидная ДНК деградирует. Поэтому попробуйте извлечь плазмидную ДНК из свежей культуры. Если подготовка плазмиды не может быть выполнена немедленно, вы можете раскрутить бактерии и хранить осадок в морозильной камере при температуре -80 ° C для последующей подготовки плазмиды.

Жидкая культура напрямую инокулируется из колотой культуры E. coli.

Непосредственная инокуляция жидкой культуры из жидкой культуры E. coli или колотой культуры, которую вы получили от VectorBuilder, может очень редко приводить к низкому выходу.